我们从仪器角度解释一下测定数据是如何计算出来的，如果大家能熟悉这一计算过程，对于出现负值的原因查找会有帮助。
现就以2点终点法为例子。
首先是吸光度度的计算，下面给出的是一个尿酸标本测定曲线，其中黑色圈内的测光点是我们计算用的，分别是15点与16点的吸光度均值A1、33点与34点的吸光度均值A2.其公式为
A=A2-K*A1
其中K为液量修正系数，其计算方法为：
K=（S+R1）/（S+R1+R2）
S是标本量、R1、R2分别是试剂一、二的量。
这时我们得到吸光度A值后，开始浓度的计算：
浓度C=[K*（A－B）+C1]*IFA+IFB，其中B是S1ABS吸光度，也就是空白或第一标准液的吸光度医学教.育网搜集整理，C1是空白或是第一标准液浓度，K是K系数，也就是所做标准曲线的斜率，IFA、IFB都是仪器常数，在一般情况下IFA=1，IFB=0，C1=0，所以该公式可以简化成C=K*（A-B），K系数的计算是通过仪器测定S1（标准液1）、S2（标准液2）的A值以及给定的浓度来计算的。
通过以上计算我们可以知道结果为负值有两个环节可能出现，一是A2－K*A1时，第二是A－B（空白吸光度）时，前一种情况说明试剂质量完全失效，应更换，但是日常出现这样情况非常少见，而第二种情况是最多见的，所以为什么总是推荐大家每天做空白校正，就是这个原因。每天的试剂都在变化，试剂空白吸光度也在变化，这样既可以预防试剂过期，也可以减少被测物含量很低的标本出现负值的几率。
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